近些年来随着人们对银杏综合利用的逐年增多,现有的一些遗传改良措施对提高银杏叶片产量及木材生长等性状的改善虽有一定成效,但还远没有达到理想的效果。因此,主要针对用秋水仙碱人工诱导银杏2n雄配子及其相关技术进行了探索性研究,为通过用二倍体花粉与正常银杏雌株授粉培育三倍体植株打下初步基础。 结果如下: (1)无论是温室水培条件下还是自然状态下的银杏花芽,虽然由于小气候及环境的不同,使得花芽进入减数分裂的时间有所差异,但是每个地点的银杏小孢子母细胞减数分裂进程与其外部形态的相关性却是一致的。所以,通过掌握银杏小孢子母细胞减数分裂进程及其与花芽外部形态的相关性,可通过观察花芽外部形态来及时判别减数分裂时期,以确定适宜的染色体加倍时期。
(2)试验中所采用处理方式不同,秋水仙碱溶液的有效浓度也不同。棉浸法的有效处理浓度为0.6%～1.0%,而瓶浸法有效浓度为0.6%～0.8%。
(3)通过05～06年两年的花粉染色体加倍试验,温室水培和自然状态下的花芽均获得了大花粉,但得率并不高,为7%。 (4)经染色体加倍处理所获得的2n花粉粒,体积明显比正常的花粉粒大,并将激光扫描共聚焦显微镜用于大花粉粒的倍性鉴定。大花粉DNA含量的LSCM测定结果证明了二倍体花粉粒DNA含量是单倍体花粉粒的二倍,进一步认定了本试验中经秋水仙碱诱导处理得到的大花粉是染色体未减数的二倍体花粉。
(5)筛选出了适合本试验花粉离体萌发的培养基组合为:1%琼脂+3%蔗糖+硼60mg/L+钙100mg/L;综合比较了3种不同的染色方法,认为TTC法是一种能与离体萌发法相互印证的、比较适合银杏花粉生活力测定的染色法。 |
